期刊:中国兽医科学 ISSN:1673-4696 , 年:2018 . 卷:48 . 期:1   页码:1-6

摘要

根据A型流感病毒M基因核苷酸序列设计引物及探针,建立了一种灵敏度高、特异性强、检测迅速、操作简便的重组酶聚合酶扩增技术(RT-RPA)。选用常见动物疫病病原验证引物探针的特异性,设计多对引物及探针,筛选出最适反应体系及反应条件,并与实时荧光RT-PCR方法比较。结果显示,本研究建立的RT-RPA方法特异性强,只有A型动物流感病毒呈阳性,其他相关常见病原均为阴性;反应时间短,检测反应时间仅需20 m in;灵敏度高,最低可检测到A型动物流感病毒核酸浓度为0.96×10~(-2) g/mL 。与实时荧光RT-PCR方法相比,其灵敏度稍低。本研究建立的检测A型动物流感病毒的RT-RPA方法特异性强,灵敏性高,操作简单,检测快速,适合现场检测以及在基层实验室推广应用。

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关键词
A型动物流感病毒;  重组酶聚合酶扩增技术(RPA);  等温扩增

作者信息

作者机构:
     [1] [ 王潇 ]  深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;;华南农业大学兽医学院
     [2] [ 曹琛福;  林彦星;  黄超华;  花群义 ]  深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
     [3] [ 贾伟新 ]  华南农业大学兽医学院